初代培養神経細胞への遺伝子導入法(
35 mm培養皿) written by Shirao at 1/20/99トランスフェクタム溶液の作製と保存
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エタノールとモレキュラーシーブを混合し、無水エタノールを作製する。2
無水エタノールを一度濾過する。3 0.5 mg
のトランスフェクタムを200 _l の無水エタノールで溶かす。4
良く混合し室温で5分間インキュベートする。5
その後一晩以上4℃で保存する。(早めに使う)
細胞へのトランスフェクション
1 2 _g
のプラスミドを200 _l のMEMに混ぜる(vortex)。2
トランスフェクタムをよく混ぜる(vortex)。3 4 _l
のトランスフェクタムを200 _l のMEMに混ぜる(vortex)。4
上記2液を素早く混合しする(vortex)。5
培養皿の培養液を上記混合液に置き換える。6
6時間37℃でインキュベートする。7
培地を条件培養液で置き換える。